作為一名IVD產(chǎn)品注冊專員，經(jīng)常有企業(yè)朋友咨詢膠體金法試劑研發(fā)和注冊申報(bào)中的細(xì)節(jié)問題。其中一個(gè)常見疑問就是關(guān)于企業(yè)內(nèi)部參考品濃度梯度的可視化表達(dá)方式，特別是能否使用比色卡，以及在申報(bào)資料中如何體現(xiàn)。這個(gè)問題看似簡單，但涉及到產(chǎn)品研發(fā)的嚴(yán)謹(jǐn)性和注冊資料的合規(guī)性，咱們今天就來好好聊聊。

企業(yè)內(nèi)部控制參考品濃度梯度可以用比色卡表示嗎？

答案是可以的。膠體金法定性檢測試劑，主要是通過觀察檢測線（T線）和質(zhì)控線（C線）的顯色情況（有無、深淺）來判斷樣本中目標(biāo)物（如病原體抗原/抗體、特定蛋白標(biāo)志物）的存在與否。企業(yè)在研發(fā)過程中，為了評估試劑性能的穩(wěn)定性、批間一致性以及確定臨界值（Cut-off值），通常會(huì)配制包含不同濃度目標(biāo)物的內(nèi)部參考品，形成一個(gè)濃度梯度系列。

1.這個(gè)濃度梯度系列的目標(biāo)，是模擬實(shí)際樣本中目標(biāo)物從“檢測不到”到“低濃度”（臨界值附近）再到“中/高濃度”的變化過程。傳統(tǒng)的做法可能是在研發(fā)記錄中詳細(xì)記錄每個(gè)參考品對應(yīng)的具體濃度數(shù)值。然而，在實(shí)驗(yàn)室實(shí)際操作和日常質(zhì)控中，研發(fā)人員和技術(shù)人員也需要一個(gè)直觀、快速的判讀依據(jù)。

2.這時(shí)候， 比色卡（或稱為色階卡）就派上用場了。企業(yè)可以將配制好的不同濃度的內(nèi)部參考品滴加到試劑條上，待反應(yīng)完成后，將顯色結(jié)果（主要是T線的顏色深淺）排列、拍照或掃描，制作成一張標(biāo)準(zhǔn)的比色卡圖片。這張比色卡上的每一個(gè)色階，就對應(yīng)著參考品濃度梯度中的一個(gè)特定濃度點(diǎn)，或者代表一個(gè)特定的顯色強(qiáng)度范圍。網(wǎng)上很多討論試劑研發(fā)流程的分享，也提到過類似做法，作為輔助研發(fā)人員直觀判斷顯色均一性和梯度效果的工具。

3.使用比色卡的好處是直觀、便捷，便于研發(fā)人員在優(yōu)化工藝、調(diào)試配方時(shí)快速比對不同批次或不同條件下的顯色差異，也方便生產(chǎn)或質(zhì)檢人員在日常質(zhì)控中快速判斷試劑條的顯色是否符合預(yù)期梯度。國家藥監(jiān)局醫(yī)療器械技術(shù)審評中心（器審中心）在相關(guān)答疑中也指出，這種基于色階的判讀方式，有助于反映樣本在特定濃度下的顯色均一性。

所以，總結(jié)這第一點(diǎn)：企業(yè)完全可以根據(jù)自身研發(fā)和質(zhì)控流程的實(shí)際需要，自行決定是否為內(nèi)部參考品濃度梯度制作并使用比色卡。法規(guī)沒有強(qiáng)制要求必須使用，但也沒有禁止，這屬于企業(yè)內(nèi)部控制策略的一部分。

如果用了比色卡，申報(bào)資料里需要寫進(jìn)去嗎？怎么寫？

如果企業(yè)在研發(fā)和質(zhì)控過程中確實(shí)設(shè)置并使用了比色卡來輔助表示內(nèi)部參考品濃度梯度，那么在提交注冊申報(bào)資料時(shí)，必須在相關(guān)部分進(jìn)行體現(xiàn)。關(guān)鍵點(diǎn)在于“研究資料”中的“參考品”部分。

1.參考品制備過程的詳細(xì)描述：在申報(bào)資料的“研究資料”章節(jié)中，詳細(xì)說明企業(yè)內(nèi)部參考品的來源（如重組蛋白、臨床樣本陽性池等）、配制方法（如稀釋基質(zhì)、稀釋倍數(shù)）、定值過程（如何確定每個(gè)梯度點(diǎn)的濃度值）以及最終確定的濃度梯度范圍。這部分描述是基礎(chǔ)，無論是否使用比色卡都需要提供。

2.明確說明比色卡的設(shè)置和應(yīng)用：如果企業(yè)使用了比色卡，那么在上述參考品制備描述的基礎(chǔ)上，必須額外清晰地寫明：

（1）比色卡是如何制作的：是基于哪一批次或哪個(gè)特定條件下配制的參考品制作的？使用了什么方法（如拍照、掃描）？是否進(jìn)行了標(biāo)準(zhǔn)化處理（如白平衡校正）？

（2）比色卡與濃度梯度的對應(yīng)關(guān)系：比色卡上的每一個(gè)色階具體對應(yīng)參考品濃度梯度中的哪個(gè)濃度點(diǎn)或哪個(gè)濃度范圍？這種對應(yīng)關(guān)系是如何建立和驗(yàn)證的？例如，可以說明“色階1對應(yīng)濃度為X ng/mL的參考品顯色結(jié)果，色階2對應(yīng)濃度為Y ng/mL...”。

（3）比色卡在研發(fā)和性能評估中的作用：簡要說明比色卡在哪些環(huán)節(jié)被使用，比如在檢出限確定時(shí)用于判斷臨界顯色水平，在精密度研究中用于評估不同批次/不同操作者判讀顯色一致性的工具等。器審中心明確建議，在分析性能評估（如檢出限、精密度、特異性）中提交利用內(nèi)部色卡（比色卡）進(jìn)行研究的結(jié)果，因?yàn)樗芴峁╆P(guān)于顯色均一性的重要信息。

簡單說，在申報(bào)資料的“參考品制備”相關(guān)內(nèi)容里，不能只說“我們做了個(gè)比色卡”，而是要把參考品是怎么配出來的，以及這個(gè)比色卡具體是怎么做出來的、怎么用的、代表什么意義，都原原本本、清清楚楚地寫明白。這樣審評老師才能理解企業(yè)質(zhì)量控制的手段和依據(jù)，評估其科學(xué)性和可靠性。

總結(jié)一下

關(guān)于膠體金法定性檢測試劑企業(yè)內(nèi)部參考品濃度梯度是否能用比色卡表示以及在注冊資料中如何體現(xiàn)，核心要點(diǎn)就兩條：

1.企業(yè)可自行確定是否設(shè)置比色卡。用不用，企業(yè)自己根據(jù)內(nèi)部管理需求定。

2.如果企業(yè)設(shè)置了比色卡，研究資料中需寫明企業(yè)參考品配制過程及比色卡是如何設(shè)置的。只要用了，在申報(bào)資料的研究部分，就必須把參考品怎么配的、比色卡怎么做怎么用的，詳細(xì)描述清楚。

理解并落實(shí)好這兩點(diǎn)，企業(yè)在進(jìn)行膠體金試劑研發(fā)和注冊申報(bào)時(shí)，在參考品濃度梯度管理和相關(guān)申報(bào)資料準(zhǔn)備上，就能做到既符合法規(guī)要求，又能有效支持產(chǎn)品的性能宣稱。希望這篇文章能幫您理清思路。