受理號：CSZ2200197

體外診斷試劑產(chǎn)品注冊技術(shù)審評報告

產(chǎn)品中文名稱：抗人球蛋白檢測試劑盒（水性膠法）

產(chǎn)品管理類別：第三類

申請人名稱：長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司

國家藥品監(jiān)督管理局
醫(yī)療器械技術(shù)審評中心

基本信息

一、申請人名稱長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司

二、申請人住所長春市高新北區(qū)新浦路 285 號

三、生產(chǎn)地址長春市高新北區(qū)新浦路 285 號

技術(shù)審評概述

一、產(chǎn)品概述

（一）產(chǎn)品主要組成成分

反應(yīng)板、水性膠、低離子強度鹽溶液、封板膜、判讀對照卡，主要成分見表 1。

表 1 試劑盒主要組成成分

（二）產(chǎn)品預(yù)期用途

用于直接抗人球蛋白試驗（自身免疫性溶血性疾病、新生兒溶血）和間接抗人球蛋白試驗，主要用于不規(guī)則抗體篩查、交叉配血、IgG 型不規(guī)則抗體致敏紅細胞的檢測。本品僅用于臨床檢測，不用于血源篩查。不規(guī)則抗體是引起臨床輸血反應(yīng)的主要原因之一。臨床為確保安全輸血、診斷治療新生兒溶血病等，對既往史有輸血、妊娠、血液病及輸過血液制品的人群和孕婦等都要求常規(guī)檢測不規(guī)則抗體；所有人群在輸血前均應(yīng)用 Coombs 試驗進行交叉配血檢測。Coombs試驗是經(jīng)典的檢測不規(guī)則抗體（主要是IgG類）的方法，抗人球蛋白檢測試劑盒（水性膠法）是基于 Coombs 試驗結(jié)合免疫吸附原理研制的產(chǎn)品。

（三）產(chǎn)品包裝規(guī)格

96T/盒（貨號：BX9001）、64T/盒（貨號：BX9002）

（四）產(chǎn)品檢驗原理

本產(chǎn)品是水性膠免疫分析技術(shù)結(jié)合免疫吸附原理的抗人球蛋白試驗，檢測被測紅細胞在體內(nèi)是否被 IgG 型不規(guī)則抗體致敏或被測血漿/血清中是否含有 IgG 型不規(guī)則抗體。

水性膠是一種分離介質(zhì)，可以將被測物中的細胞成分和非細胞成分進行分離從而去除非特異性干擾，因此檢測過程中無需洗滌即可實現(xiàn)準(zhǔn)確檢測目的。試劑盒 U 型微孔板包被羊抗人多克隆抗人球蛋白抗體（AHG），水性膠加入 U 型管后通過離心進入 U 型微孔板中。間接抗人球蛋白試驗中紅細胞與被測血漿/血清在 U 型管中 37℃孵育 15min，紅細胞表面抗原與被測血漿/血清中 IgG 型不規(guī)則抗體結(jié)合，形成紅細胞免疫復(fù)合物；直接抗人球蛋白試驗中被測紅細胞已在體內(nèi)被 IgG 型不規(guī)則抗體致敏，形成紅細胞免疫復(fù)合物。

在一定離心力的作用下，紅細胞及其免疫復(fù)合物穿過水性膠到達 U 型微孔板底部，血漿/血清中非細胞成分不能通過水性膠。紅細胞免疫復(fù)合物被 U 型微孔板上包被的 AHG 捕獲，平鋪在 U 型微孔板底部表面，形成陽性反應(yīng)；若被測血漿/血清中不含 IgG 型不規(guī)則抗體或被測紅細胞未在體內(nèi)被 IgG 型不規(guī)則抗體致敏，則紅細胞不能形成免疫復(fù)合物，不能被 U 型微孔板上的 AHG 捕獲，在一定離心力的作用下紅細胞聚集于 U 型微孔板底部中央，形成陰性反應(yīng)。

二、臨床前研究概述

（一）主要原材料

主要原材料：包括羊抗人免疫球蛋白及水性膠，羊抗人免疫球蛋白為羊源多克隆抗體。主要原材料均為外購。申請人制定了主要原材料質(zhì)量要求并經(jīng)檢驗合格。

（二）生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系研究

申請人通過探索反應(yīng)板抗體包被濃度，包被時間/溫度條件，封閉液的種類，抗體保護劑的用量，反應(yīng)板干燥條件，水性膠的濃度、pH 及防腐劑的種類，確定了最佳的生產(chǎn)工藝，包括：抗人球蛋白抗體的包被量、包被條件、封閉液配方、保護劑配方以及干燥條件、水性膠的配方等。通過對樣本用量，試劑用量，孵育條件和離心條件的探索確定了最佳的反應(yīng)體系。

（三）分析性能評估

本產(chǎn)品分析性能包括血清和血漿樣本適用性、準(zhǔn)確度、精密度、靈敏度、干擾試驗。申請人提交了三批產(chǎn)品（SY20200601、SY20200602、SY20200603）在適用機型上的性能評估資料。

針對適用的樣本類型，申請人采用 15 份同源血清、血漿樣本進行比較研究，試驗結(jié)果顯示添加 IgG 型抗體后檢測結(jié)果均為陽性，且凝集強度均一致；未添加 IgG 型抗體的陰性血漿及血清樣本檢測結(jié)果均為陰性。血清和血漿檢測結(jié)果完全一致；此外通過添加 EDTA、肝素、枸櫞酸鈉三種抗凝劑的方式考察不同抗凝劑對樣本檢測的影響，結(jié)果顯示 EDTA 抗凝血漿符合檢測要求。

進一步驗證 EDTA 終濃度為 0mg/mL、1.5mg/mL、2.2mg/mL 收集樣本對檢測結(jié)果無影響。針對準(zhǔn)確度研究，申請人使用 7 種 IgG 型血型抗體與相應(yīng)抗原陽性紅細胞及抗原陰性紅細胞反應(yīng)/制備致敏細胞，驗證試劑盒間接/直接抗人球蛋白試驗準(zhǔn)確度；使用已知結(jié)果的間接抗人球陰性/陽性臨床樣本各 50 例比較檢測結(jié)果與實際結(jié)果是否一致，直接抗人球試驗陰性/陽性臨床樣本各 50 例比較檢測結(jié)果與實際結(jié)果是否一致。結(jié)果顯示本試劑盒間接抗人球蛋白試驗和直接抗人球蛋白試驗準(zhǔn)確度符合率 100%，檢測結(jié)果與實際結(jié)果一致，且 2 種適用機型檢測結(jié)果一致。針對精密度研究，申請人分別采用能產(chǎn)生 2+、1+凝集強度的 IgG 型抗 D 抗體、抗 Jka 抗體、抗 Fya 抗體及相應(yīng)抗原陽性細胞反應(yīng)、陰性血清與紅細胞反應(yīng)進行重復(fù)性驗證。批內(nèi)重復(fù)性采用同一批次試劑重復(fù)進行檢測，重復(fù)次數(shù)不少于 10次。日間重復(fù)性采用同一批次試劑每日重復(fù)進行檢測，重復(fù)天數(shù)不少于 10 天。批間重復(fù)性采用至少 3 批試劑進行重復(fù)檢測。結(jié)果顯示本試劑盒間接抗人球蛋白試驗批內(nèi)、批間及日間重復(fù)性檢測結(jié)果符合率均為 100%。針對靈敏度評價，申請人使用臨床有意義的血型系統(tǒng)至少7 種不規(guī)則抗體（IgG）進行梯度稀釋進行檢測簡介抗人球蛋白試驗結(jié)果，抗體梯度稀釋制備致敏細胞檢測直接抗人球蛋白試驗結(jié)果，同步比較不規(guī)則抗體水性膠法與試管法效價，試管法采用抗人球蛋白試劑國家標(biāo)準(zhǔn)品或用國家標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)定的企業(yè)內(nèi)部參考品，其中 D 抗體從 512 倍開始 2 倍倍比梯度稀釋至 16384倍，其余抗體從原倍開始 2 倍倍比稀釋至 128 倍進行檢測間接/直接抗人球試驗。結(jié)果顯示本試劑盒與已知抗體效價的血型抗體最高稀釋倍數(shù)的凝集強度＞1+，且抗體效價高于試管法間接/直接抗人球蛋白法測定結(jié)果。

針對干擾試驗，申請人在強、中、弱性質(zhì)的血型抗體及陰性樣本中添加不同濃度血紅蛋白、甘油三酯及膽紅素，使用 3 批試劑進行檢測，評估樣本中能夠產(chǎn)生影響的臨界濃度。在強、中、弱性質(zhì)的抗體致敏紅細胞及未致敏紅細胞中添加不同濃度血紅蛋白、甘油三酯及膽紅素進行評價。結(jié)果顯示：血漿/血清中甘油三酯濃度≤5mg/mL，膽紅素≤1.5mg/mL，血紅蛋白≤50mg/mL時不會對試劑盒間接抗人球蛋白試驗、直接抗人球蛋白試驗檢測結(jié)果產(chǎn)生影響。

（四）陽性判斷值或參考區(qū)間研究

本產(chǎn)品是水性膠免疫分析技術(shù)結(jié)合免疫吸附原理的抗人球蛋白試驗，通過倍比稀釋 IgG 型抗 D、Fya 抗體及 Jka 抗體，使用試管法并同步使用三批試劑進行間接抗人球蛋白試驗檢測，使之形成 4+～1+依次減弱的陽性結(jié)果。綜上確定本產(chǎn)品不同強度判定結(jié)果，對本產(chǎn)品陽性判斷值的適用性進行了驗證。

（五）穩(wěn)定性研究

申請人對本產(chǎn)品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的實時穩(wěn)定性、37℃加速穩(wěn)定性、運輸條件放置穩(wěn)定性、試劑開封穩(wěn)定性、運輸穩(wěn)定性等進行了系統(tǒng)的研究，確定了在各種條件下試劑的有效保存時間。

樣本穩(wěn)定性研究：為考察該產(chǎn)品對不同條件下不同儲存時間的樣本檢出性能，申請人使用該產(chǎn)品分別對短期儲存、長期儲存的樣本進行測試，研究結(jié)果支持說明書聲稱。

三、臨床評價概述

申請人在吉林大學(xué)第一醫(yī)院、吉林省人民醫(yī)院、浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬邵逸夫醫(yī)院和吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院共 4 家臨床機構(gòu)完成了臨床試驗。入組病例包括需要進行抗人球蛋白檢測的病例，其中包括腫瘤、血液病、自身免疫病等病例。采用試驗體外診斷試劑與已上市同類產(chǎn)品進行比較研究試驗，確認本產(chǎn)品的臨床性能。對比試劑為長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司的抗人球蛋白檢測卡。

針對不規(guī)則抗體篩查試驗，臨床試驗共入組受試者4023例，其中不規(guī)則抗體陽性病例 128 例，不規(guī)則抗體陰性病例 3895 例；試驗結(jié)果顯示，本產(chǎn)品與對比試劑比較的陽性符合率為 100.00%（95%CI：97.09%，100.00%），陰性符合率為 100.00%（95%CI：99.90%，100.00%），總符合率為 100.00%（95%CI：99.90%，100.00%）。另外，還開展了試驗試劑手工法和試驗試劑全自動儀器檢測結(jié)果的一致性比較研究，共入組受試者 1006 例，其中不規(guī)則抗體陽性病例 17 例，不規(guī)則抗體陰性病例 989 例；試驗結(jié)果顯示，試驗試劑手工法和試驗試劑全自動儀器檢測結(jié)果的符合率為 100%。

針對交叉配血試驗，臨床試驗共入組受試者 3885 例，交叉配血主側(cè)試驗，相合病例 3825 例，不相合病例 60 例，交叉配血次側(cè)試驗，相合病例 3755 例，不相合病例 130 例；試驗結(jié)果顯示，本產(chǎn)品與對比試劑比較的陽性符合率為 100.00%（95%CI：97.72%，100.00%），陰性符合率為 100.00%（95%CI：99.90%，100.00%），總符合率為 100.00%（95%CI：99.90%，100.00%）。

另外，還開展試驗試劑手工法和試驗試劑全自動儀器檢測結(jié)果的一致性比較研究，共入組受試者1022例，交叉配血主側(cè)試驗，相合病例 1018 例，不相合病例 4 例，交叉配血次側(cè)試驗，相合病例 989 例，不相合病例 33 例；試驗結(jié)果顯示，試驗試劑手工法和試驗試劑全自動儀器檢測結(jié)果的符合率為 100%。針對 IgG 型不規(guī)則抗體致敏紅細胞檢測試驗，臨床試驗共入組受試者 4068 例，其中自身免疫性溶血性疾病 190 例，新生兒溶血病 103 例；陽性樣本 251 例，陰性樣本 3817 例；試驗結(jié)果顯示，本產(chǎn)品與對比試劑比較的陽性符合率為 100.00%（95%CI：98.49%，100.00%），陰性符合率為 100.00%（95%CI：99.90%，100.00%），總符合率為 100.00%（95%CI：99.91%，100.00%）。

另外，還開展試驗試劑手工法和試驗試劑全自動儀器檢測結(jié)果的一致性比較研究，臨床試驗共入組受試者1051例，其中陽性樣本 104 例，陰性樣本 947 例；試驗結(jié)果顯示，試驗試劑手工法和試驗試劑全自動儀器檢測結(jié)果的符合率為 100%。綜上所述，臨床試驗結(jié)果顯示該產(chǎn)品與已上市同類產(chǎn)品的一致性較好。

四、產(chǎn)品受益風(fēng)險判定

根據(jù) YY/T 0316-2016 醫(yī)療器械風(fēng)險管理標(biāo)準(zhǔn)，對本產(chǎn)品進行風(fēng)險和受益分析。經(jīng)綜合評價，本產(chǎn)品的受益大于風(fēng)險。

（一）受益評估

不規(guī)則抗體是引起臨床輸血反應(yīng)的主要原因之一。臨床為確保安全輸血，對既往史有輸血、妊娠、血液病及輸過血液制品的所有受血者和供血者及孕婦等都要求常規(guī)檢測不完全抗體以及受血者和供血者交叉配血是否相容。已有大量的臨床研究證明抗人球蛋白試驗?zāi)軌驒z出受血者及供血者中不規(guī)則抗體，能夠提高輸血安全，提高了患者的臨床受益。該產(chǎn)品為一種用于不規(guī)則抗體篩查、交叉配血以及致敏細胞檢測的水性膠法抗人球蛋白試劑，為臨床常規(guī)進行間接抗人球蛋白試驗以及直接抗人球蛋白試驗提供了檢測方法。

綜合回顧性臨床研究和分析性能等前期實驗室研究，產(chǎn)品分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性可控，臨床試驗結(jié)果顯示該產(chǎn)品與已上市同類產(chǎn)品的一致性較好。產(chǎn)品同時能夠免除樣本中纖維蛋白等其他大分子非特異性成分的干擾，能夠保證輸血安全。本產(chǎn)品為體外診斷試劑，不接觸患者，不會對患者造成外的損害。

（二）風(fēng)險評估

1.假陽性和假陰性分析結(jié)果導(dǎo)致的風(fēng)險

目前未在前期研究或臨床試驗過程中發(fā)現(xiàn)假陽性或假陰性結(jié)果，若出現(xiàn)假陽性或假陰性結(jié)果，影響患者進行輸血配血或可能導(dǎo)致輸注不合血液出現(xiàn)溶血現(xiàn)象。對檢測結(jié)果存疑樣本，增加說明書提示，臨床應(yīng)結(jié)合實際情況使用其他方法學(xué)產(chǎn)品或參照金標(biāo)準(zhǔn)進行重復(fù)檢測，進一步降低風(fēng)險。

2.操作不規(guī)范導(dǎo)致的風(fēng)險檢測人員操作不規(guī)范會增加結(jié)果出現(xiàn)錯誤的風(fēng)險。

對檢測醫(yī)生進行規(guī)范化培訓(xùn)，可控制風(fēng)險。

（三）受益-風(fēng)險的確定

患有腫瘤疾病、血液病、自身免疫性疾病、手術(shù)患者或其他涉及輸注全血、濃縮紅細胞、紅細胞懸液、洗滌紅細胞、冰凍紅細胞、濃縮白細胞、手工分離濃縮血小板等患者，需要常規(guī)進行交叉配血及不規(guī)則抗體篩查，患有或疑似自身免疫性溶血、新生兒溶血以及藥物性溶血患者均需進行致敏紅細胞檢測，本產(chǎn)品能夠為患者提供符合要求的檢測結(jié)果，能夠檢出臨床弱抗體及去除樣本中干擾成分對檢測結(jié)果的干擾，患者可獲得受益。

通過風(fēng)險/受益綜合評價，目前已知及可預(yù)見風(fēng)險是可控的，認為該產(chǎn)品上市帶來的預(yù)期受益大于風(fēng)險。

綜合評價意見

依據(jù)《醫(yī)療器械監(jiān)督管理條例》（國務(wù)院令第 739 號）、《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》（國家市場監(jiān)督管理總局令第 48 號）等相關(guān)醫(yī)療器械法規(guī)與配套規(guī)章，經(jīng)對申請人提交的注冊申報資料進行系統(tǒng)評價，申報產(chǎn)品符合安全性、有效性的要求，符合現(xiàn)有認知水平，建議準(zhǔn)予注冊。

2025 年 1 月 2 日

來源：CMDE